不同浓度筛选剂、抑菌抗生素和激素浓度配比对‘新疆大叶’三种外植体愈伤组织诱导的影响

Effects of different concentrations of screening agents、antibacterial antibiotic and hormones on callus induction of three explants of ‘Xinjiang Daye’

摘要:

【目的】确定紫花苜蓿遗传转化中愈伤组织诱导阶段筛选剂的筛选压以及抑菌抗生素浓度和激素配比。【方法】本研究以‘新疆大叶’紫花苜蓿的下胚轴、子叶、真叶为外植体,采用3因素3水平的正交试验法分析筛选剂PPT/Km、抑菌抗生素Cef和激素配比对3种外植体愈伤组织诱导的影响。【结果】1)PPT作为筛选标记,下胚轴作为外植体时, 3mg/L PPT为筛选压；子叶为外植体时,筛选压为2mg/L；真叶的筛选压为1mg/L。2)Km作为筛选标记,外植体为子叶和真叶时,筛选压为40mg/L；下胚轴在40mg/L Km筛选压下仍有较高的出愈率,故还需筛选更高的浓度。3)直观分析和方差分析结果表明,3种因素对外植体愈伤组织诱导的影响主次顺序为PPT/Km>Cef>激素配比,PPT/Km对三种外植体的愈伤组织诱导有显著影响,Cef和激素配比对愈伤组织诱导的影响不显著；为了有更好的抑菌效果,选择400mg/L Cef作为抑菌浓度,3种激素配比可以任意选择。【结论】确定了2种筛选标记对3种外植体在愈伤组织诱导阶段的筛选压及Cef和激素在培养基中的添加量。

Abstract: