摘要:【目的】对采自青藏高原高寒草甸的黄绿卷毛菇(Floccularia luteovirens)子实体内生细菌进行分离培养及固氮功能验证,为后期利用内生细菌促进高寒草甸大型真菌的生长,进而维持草甸健康奠定基础。【方法】采用高通量分离培养方法从黄绿卷毛菇子实体内分离获得细菌菌株,使用16S rRNA基因序列进行物种组成分析和构建系统发育树。【结果】共分离获得87株细菌菌株,属于厚壁菌门(Firmicutes)、放线菌门(Actinobacteria)、变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)4个门18属40种。优势菌门是放线菌门(Actinobacteria,57.50%),优势菌属是索丝菌属(Brochothrix,26.44%),优势菌种是热杀索丝菌(Brochothrix thermosphacta,26.44%)。并且分离到1株潜在新种以及12株固氮菌。【结论】高通量分离培养方法提高了细菌分离培养的效率,从黄绿卷毛菇(F. luteovirens)子实体中分离到的40种细菌为后续利用内生细菌促进高寒草甸大型真菌的生长,进而维持草甸健康奠定基础。