摘要:【目的】建立草地早熟禾初生叶与胚根为外植体的愈伤组织诱导体系,筛选可能参与其愈伤组织形成的候选基因。【方法】以商用品种‘巴润’草地早熟禾无菌苗的初生叶和胚根的不同部位为外植体,分别研究不同2,4-D浓度、2,4-D与6-BA不同配比以及不同碳源种类对其愈伤组织诱导效果的影响,并分析出愈过程中与愈伤组织形成有关基因的表达量变化。【结果】6个不同部位的外植体中仅叶基和根尖具有愈伤组织形成能力,且均在2,4-D为4 mg/L时出愈率最高,分别为86.67%和96.67%,叶基愈伤组织的褐化率为5.33%,根尖诱导的愈伤组织未见褐化。麦芽糖为碳源时,叶基愈伤组织生长最快且褐化率最低；蔗糖为碳源时,根尖的出愈率较高且生长最快。PpWOX11、PpWOX12B、PpBBM1、PpBBM2、PpBBML、PpCRL1等基因的表达量均在叶基和根尖愈伤组织诱导的第1-3 d最高；PpWOX5的表达量在叶基愈伤组织诱导的第2 d最高,在根尖中第8 d最高；PpSET1的表达量在叶基和根尖诱导愈伤的第0 d最高。【结论】草地早熟禾愈伤组织诱导的最佳外植体为叶基和根尖,最佳激素浓度为4 mg/L 2,4-D,最佳碳源分别为麦芽糖和蔗糖,推测PpWOX11、PpWOX12B、PpBBM1、PpBBM2、PpBBML、PpCRL1等基因可能有促进愈伤组织启动的潜能,PpSET1对愈伤组织诱导没有促进作用。
